2149
правок
Изменения
→Связывание лекарства с рецептором
'''Полулогарифмические графики обычно используют и для кривых концентрация-ответ, и для изучения связывания'''
[[Image:Ph_2_4.jpg|300px|thumb|right|Рис. 2.4 Линейный график специфического и неспецифического рецепторного связывания двух препаратов, А и В]]
График [DR] против [D] для двух лекарств (А и В с очень разными значениями KD) приведен на рис. 2.4. На нем видно, что хотя оба графика характеризуются одинаковым начальным линейным подъемом по концентрации, который к максимуму уплощается, неудобно использовать одну и ту же ось X для обоих лекарств. На рис. 2.5 те же данные представлены как полулогарифмические, т.е. [DR] против log[D]. Графики показывают, что обе кривые в целом одинаковы и различаются только в положении относительно оси X. Такие полулогарифмические кривые используют для изучения связывания и зависимости доза-ответ.
При изучении связывания рецепторы инкубируют при различных концентрациях D, когда D мечен радиоактивным изотопом (обычно 3Н), затем их быстро фильтруют и промывают для удаления несвязанного лекарства. Последующий подсчет остаточной радиоактивности показывает, сколько лекарства осталось. Однако некоторая оставшаяся часть обусловлена простой неспецифической задержкой лекарства в порах фильтра либо между клетками или, вероятно, растворением в липидах ткани. Эффект неспецифического связывания выражается в процентах от специфического.
'''Исследования связывания дают ценную информацию о взаимодействиях между лекарством и рецептором'''
Предположим, что рецептор может связать молекулу лекарства (D) и лекарства (I), но не одновременно (рис. 2.6). В данном случае рецептор может существовать в трех формах:[[Image:Ph_2_6.jpg|300px|thumb|right|ПОДПИСЬ]]
*свободный R с концентрацией [R];
где [Rt] — сумма всех форм R. Сходные уравнения могут быть получены для [DR] и [IR]. Далее серия уравнений может быть выведена путем замещения.
Важно, что если [D] достаточно высока, то большинство рецепторов будет связано с D (DR), несмотря на присутствие I. И наоборот, если [I] достаточно высока, большинство рецепторов будет связано с I (IR), несмотря на присутствие D. Таким образом, I конкурирует с D, a D c I. Конкуренция возникает из-за невозможности рецептора связать D и I одновременно. Конкурирование математически эквивалентно произведению константы диссоциации (1 + с), где с - концентрация конкурента, индуцирующего параллельный сдвиг кривой [DR] против log[D] (кривая доза-ответ) вправо по оси X. Сдвиг будет определяться log(l + с), где с = [I]/Kj (рис. 2.7).[[Image:Ph_2_7.jpg|300px|thumb|right|Рис. 2.7 Специфическое связывание препарата (L) в присутствии конкурентного антагониста (I) при различных концентрациях [l]/K]]
На этом построен метод экспериментального определения константы диссоциации конкурирующей молекулы. При любой [I] отношение доз (dose ratio) (DR), равное значениям [D], формирующим такую же [DR] в присутствии или в отсутствии С, рассчитывают как: